劃痕(修復)實驗服務(wù)
細胞劃痕實驗服務(wù)原理
將細胞培養(yǎng),觀察細胞向無細胞的劃痕區(qū)域遷移情況,來判斷細胞的遷移能力
實驗服務(wù)目的
細胞劃痕法檢測細胞的遷移能力
實驗儀器
超凈工作臺、CO2培養(yǎng)箱、生物倒置顯微鏡、6孔板(其他的也可以,但感覺6孔比較好,大小適中)、marker筆、直尺20、 微升槍頭(滅菌)、無血清培養(yǎng)基、 PBS
實驗準備
所有能滅菌的器械都要滅菌,直尺和marker筆在操作前紫外照射30min (超凈臺內(nèi))
實驗流程
1.先用marker筆在6孔板背后,用直尺比著,均勻得劃橫線,大約每隔0.5~1cm-道,橫穿過孔。每孔至 少穿過5條線。
2在空中加入約5X105個細胞,具體數(shù)量因細胞不同而不同,掌握為過夜能鋪滿。
3.第二天用槍頭比著直尺,盡量垂至于背后的橫線劃痕,槍頭要垂直,不能傾斜。
4.用PBS洗細胞3次,處劃下的細胞,加入無血清培養(yǎng)基。
5.放入37度5%CO2培養(yǎng)箱,培養(yǎng)。按0,6, 12, 24小時取樣,拍照。
細胞劃痕實驗服務(wù)內(nèi)容與方法
1、使用marker筆在6孔板背后,均勻得劃橫線,大約每隔0.5-1cm一道,橫穿過孔。每孔至少穿過5條
2、在孔中加入約5*105個細胞,具體數(shù)量因細胞不同而不同,掌握為過夜能鋪滿。
3、第二天用槍頭比著直尺,盡量垂至于背后的橫線劃痕,槍頭要垂直,不能傾斜。
4、用PBS洗細胞3次,去除劃下的細胞,加入無血清培養(yǎng)基。
5、放入37度5%co2培養(yǎng)箱,培養(yǎng)。按0,6, 12, 24小時取樣,拍照。
細胞劃痕實驗服務(wù)內(nèi)容與方法
1、使用marker筆在6孔板背后,均勻得劃橫線,大約每隔0.5-1cm- 道,橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。
2、在孔中加入約5*105個細胞,具體數(shù)量因細胞不同而不同,掌握為過夜能鋪滿。
3、第二天用槍頭比著直尺,盡量垂至于背后的橫線劃痕,槍頭要垂直, 不能傾斜。
4、用PBS洗細胞3次,去除劃下的細胞,加入無血清培養(yǎng)基。
5、放入37度5%co2培養(yǎng)箱, 培養(yǎng)。按0, 6, 12, 24小時取樣,拍照。
細胞劃痕實驗服務(wù)信息(客戶提供)
1、生長狀況良好的細胞株,一并提供細胞特性, 培養(yǎng)條件及相關(guān)注意事項。
2、受試樣品及相關(guān)信息
細胞劃痕服務(wù)服務(wù)周期:2周
細胞劃痕實驗結(jié)果提交
提交實驗報告書(實驗材料、實驗過程、結(jié)果分析、原始數(shù)據(jù)、細胞圖片等)。
下面是照片,細胞NIH3T3
收費標準/服務(wù)周期/提供結(jié)果:
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實驗代做服務(wù):
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ELISA免費代檢測 | 免疫組化 | 熒光定量PCR | 番紅O固綠染色 |
流式細胞分選技術(shù) | 激光共聚焦 | 透射電鏡服務(wù) | DNA甲基化實驗 |
免疫共沉淀(Co-IP) | DNA甲基化 | 掃描電鏡實驗 | 石蠟冰凍切片TUNEL凋亡熒光 |
免疫組化IHC染色 | 分子克隆和質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù) | 原位雜交(FIsh) | 石蠟/冰凍切片凋亡 |
RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀(RIP) | CCK8檢測 | 蛋白雙向(2-D)電泳 | 蛋白雙向2D-WB |
ATP/ADP檢測 | Taqman探針 | 細胞劃痕 | 基因組DNA提取 |