乙酰丁香酮是一種酚類化學(xué)物,分子式是HOC6H2(OCH3)2COCH3。 類白色或淺褐色粉末或結(jié)晶,溶于CH2Cl2 ,參考濃度25mg/ml或2.5%??烧T導(dǎo)膿桿菌Vir基因的活化,從而促進(jìn)外源基因的整合。作用機(jī)理是通過誘導(dǎo)農(nóng)桿菌Vir區(qū)基因的活化與表達(dá),促進(jìn)T-DNA的加工與轉(zhuǎn)移,從而促使農(nóng)桿菌T-DNA更容易進(jìn)入植物基因組并與其整合。
乙酰丁香酮的配制方法:
1,用于擬南芥花侵染的,配制使用的容積為DMSO,母液為100mM,使用濃度請參照相關(guān)文獻(xiàn)。
2,另外一種是用于愈傷組織的侵染,是用少量甲醇溶解后,再用蒸餾水定容。之后過濾除菌。顯然兩者溶劑不一樣,不過建議還是使用DMSO。
乙酰丁香酮使用方法:
一般使用終濃度為100-200 umol/L。可用DMSO溶解,配置1M母液,分裝-20度保存。轉(zhuǎn)化前,將乙酰丁香酮加入轉(zhuǎn)化緩沖液,冰上放置約1 h后即可使用。
貯存條件:密封室溫保存。
乙酰丁香酮使用方法:
一般使用終濃度為100-200umol/L??捎肈MSO溶解,配置1M母液,分裝-20度保存。轉(zhuǎn)化前,將乙酰丁香酮加入轉(zhuǎn)化緩沖液,冰上放置約1h后即可使用。
貯存條件:密封室溫保存。
乙酰丁香酮(AS)的作用原理,是其可誘導(dǎo)農(nóng)桿菌Vir基因活化,從而促進(jìn)外源基因的整合。所以讓其有一定的誘導(dǎo)時間再轉(zhuǎn)化,效果要好些,而不是加完后直接轉(zhuǎn)化(需要活化)。